Interacciones entre proteínas
Disponemos de una serie de productos para el análisis de las interacciones entre proteínas, incluyendo ensayos pull-down, sistemas basados en BRET y en reporteros de complementación.
Los sistemas GST pull-down se utilizan en métodos tradicionales basados en extractos celulares y/o expresión libre de células. El HaloTag® Mammalian Pull-Down System se utiliza para aislar e identificar complejos proteicos intracelulares a partir de células de mamíferos.
Las tecnologías NanoBRET™ y NanoBiT® proporcionan métodos para el análisis directo de las interacciones entre proteínas en células vivas. El NanoBRET™ System utiliza la transferencia de energía por resonancia de bioluminiscencia (BRET) en un ensayo basado en la proximidad que detecta las interacciones entre proteínas midiendo la transferencia de energía de una proteína donante bioluminiscente a una proteína receptora fluorescente.
Los NanoBiT® Assays se basan en un sistema de dos subunidades basado en la NanoLuc® Luciferase que puede utilizarse para la detección intracelular de interacciones proteína:proteína. Las subunidades se fusionan a las proteínas de interés, formando una enzima funcional que genera una señal luminiscente brillante cuando las proteínas interactúan.
Grupos de productos de interacciones entre proteínas
Interacciones entre proteínas en células vivas
Métodos reporteros BRET y de complementación para la detección de interacciones entre proteínas cercanas a los niveles de expresión endógenos.
Interacciones proteína:ADN
Productos para capturar y evaluar la interacción de los factores de transcripción y otras proteínas con el ADN.
Sistemas pull-down y de doble híbrido
Sistemas basados en resinas y fuerza magnética para aislar proteínas de fusión a GST o HaloTag®.
Lumit® Anti-Tag PPI Reagents
Ensayo homogéneo para medir las interacciones proteína-proteína o proteína-pequeña molécula en las que intervienen proteínas marcadas.
Los mejores productos sobre interacción de proteínas para su laboratorio
HaloTag® Mammalian Pull-Down Systems
Sistemas que permiten la captura rápida de pares de proteínas simples o complejos de forma directa a partir de lisados, además de pasar de pull-downs a estudios de imaging utilizando el mismo constructo.
G6509, G6500, G6504, G6591
NanoBiT® PPI Starter Systems
Reportero de complementación para detectar interacciones entre proteínas en células vivas.
N2014, N2015, N2016
NanoBRET® PPI Starter Systems
Ensayo de interacción proteína:proteína en células vivas. Incluye vectores, controles y reactivos de detección para PPI basada en BRET.
N1811, N1821
Introducción a las interacciones entre proteínas
Las interacciones proteína:proteína (PPI) son esenciales para casi todos los procesos de una célula, por lo que comprender las PPI es crucial para entender la biología celular tanto en condiciones normales como en condiciones patológicas. Existen numerosos métodos para caracterizar las interacciones entre proteínas que utilizan extractos celulares o células vivas para expresar posibles dianas.
En un ensayo pull-down, una proteína asociada se expresa como proteína de fusión (p. ej., proteína cebo) en E. coli y luego se inmoviliza utilizando un ligando de afinidad específico para el marcaje de fusión. A continuación, la proteína cebo inmovilizada puede incubarse con la proteína presa.
La co-inmunoprecipitación es otra opción para estudiar las interacciones proteína:proteína. Para realizar la co-inmunoprecipitación, un anticuerpo contra una proteína diana se acopla a beads de Sepharose® mediante proteína A o G, para a continuación inmunoprecipitar los complejos que contienen la proteína diana con las beads acopladas al anticuerpo.
Sin embargo, estos métodos tradicionales de estudio de las interacciones entre proteínas no proporcionan información directa del entorno celular. Mediante la transferencia de energía por resonancia de bioluminiscencia (BRET) o ensayos de complementación, es posible medir de forma cuantitativa la interacción entre proteínas en células vivas.
