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Análisis de ARN

Los productos de análisis de ARN incluyen colorantes fluorescentes para la cuantificación del ARN, reactivos de transcripción in vitro, enzimas y kits de RT-PCR, y vectores para generar ARNhc (shRNA, en inglés) para su uso en experimentos de interferencia de ARN.

Los productos de RT-PCR de Promega incluyen transcriptasas inversas independientes (AMV, M-MLV y GoScript) y una gama de kits completos que contienen todas las enzimas, tampones y reactivos necesarios para realizar con éxito una RT-PCR.

Los reactivos para la transcripción in vitro incluyen sistemas de producción de ARN a gran escala (RiboMAX) y sistemas para la generación de sondas de ARN (Riboprobes).

El ARN es muy sensible a la actividad nucleasa. El inhibidor de ribonucleasas RNasin de Promega es el producto de referencia utilizado por investigadores de todo el mundo para proteger el ARN de la degradación por nucleasas.

Introducción al análisis del ARN

Las especies de ARN (ARN mensajero, ARN de transferencia, ARN ribosómico) desempeñan funciones esenciales en la traducción de la información genética del ADN a proteínas. Más recientemente, se han descrito nuevas funciones de los microARN y otros pequeños ARN no codificantes en la regulación de la expresión génica. La investigación sobre el análisis del ARN abarca una amplia gama de temas desde el análisis a gran escala del transcriptoma, el conjunto completo de transcritos de ARN codificados por un genoma, hasta el estudio de las acciones de pequeños ARN no codificantes individuales sobre genes específicos.

La transcripción in vitro es el proceso mediante el cual se genera ARN a partir de un molde de ADN en el laboratorio. Los sistemas de transcripción in vitro se utilizan para generar ARN a partir de moldes de ADN para su uso en aplicaciones como la traducción in vitro, el estudio de virus de ARN y los estudios de interacción ARN:proteína. Los Riboprobe® Systems se utilizan para preparar sondas de ARN monocatenario, cantidades del orden de microgramos de transcritos de ARN definidos y ARN antisentido para su uso en estudios de análisis de ARN.

La RT-qPCR es una técnica esencial para el análisis de la expresión génica. Los sistemas RT-qPCR se utilizan para detectar y monitorizar la expresión de dianas específicas de ARN en tiempo real durante un experimento.

Las RNasas (enzimas que degradan el ARN) son omnipresentes. Aislar con éxito el ARN y mantener su integridad es fundamental, especialmente cuando se utilizan aplicaciones posteriores sensibles (como por ejemplo, la secuenciación del ARN). Toda purificación y manipulación de ARN debe realizarse en una zona del laboratorio libre de RNasas y exclusiva para ARN, y siempre deben utilizarse guantes para evitar la contaminación accidental. El uso de un inhibidor de RNasa puede ayudar a proteger tus muestras de la degradación por RNasa.