Kits de síntesis de ARNsi y ARN de interferencia
Las herramientas de investigación diseñadas para estudios de ARN de interferencia se utilizan para suprimir la expresión de proteínas de forma transitoria o permanente, o para investigar el papel de pequeñas moléculas de ARN en la regulación de la expresión génica.
El T7 RiboMAX™ Express RNAi System es un sistema de transcripción in vitro diseñado para la síntesis eficiente de cantidades de miligramos de ARN de interferencia pequeño (ARNsi) o ARNsi de horquilla (ARNsh) para estudios de ARN de interferencia en mamíferos.
Los psiCHECK™ Vectors proporcionan un enfoque cuantitativo y rápido para la optimización inicial del ARN de interferencia. Estos vectores también son ideales para examinar el efecto de regiones 3' no traducidas (3' UTRs), como las secuencias diana de microARN (miARN), en la expresión génica.
El pmirGLO Vector está diseñado para evaluar cuantitativamente la actividad de los miARN mediante la inserción de sitios diana de miARN aguas abajo o del gen de la luciferasa firefly (luc2) en 3'. La reducción de la expresión de luciferasa firefly indica la unión de miARNs endógenos o introducidos a la secuencia diana de miARN clonada.
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Fundamentos sobre el ARN de interferencia
En el ARNi, pequeños ARN de doble cadena suprimen la expresión de una proteína diana estimulando la degradación específica del ARNm diana complementario. El ARNi es una potente técnica que permite a los investigadores estudiar la función génica eliminando o reduciendo el nivel de una proteína concreta. El ARNi es un proceso de varios pasos en el que un miembro de la familia de las RNasas III (por ejemplo, Dicer en Drosophila) reconoce el ARNdc y lo escinde en ARNsi de 21-23 nucleótidos. Los ARNsi se incorporan a un complejo de ARNi conocido como RISC (complejo de silenciamiento inducido por ARN), que destruye los ARNm homólogos al ARNsi contenido en el complejo, anulando la expresión proteica.
Los microARNs (miARN) son ARN cortos no codificantes que regulan la expresión génica. Los miARNs se dirigen a la región 3' no traducida de las secuencias de ARN mensajero, afectan a la estabilidad del ARN e impiden su traducción. Los miARNs están implicados en una amplia gama de procesos biológicos y estados patológicos como el desarrollo, el metabolismo y el cáncer.
