Promega's Política de cookies

Empleamos cookies y tecnologías similares para mantener la funcionalidad de nuestro sitio web, analizar su rendimiento, mejorar el funcionamiento y mostrar contenido personalizado. Algunas cookies son esenciales para el buen funcionamiento de nuestro sitio web. El resto no serán instaladas en su equipo sin su consentimiento. Visite la Política de Cookies para obtener mayor detalle.

Inmunoensayos

Los reactivos para inmunoensayos y los sistemas de detección basados en anticuerpos de Promega incluyen los novedosos Lumit® Immunoassays, así como una gama de anticuerpos primarios y secundarios y reactivos de detección utilizados en las técnicas ELISA o Western blot tradicionales.

Los Lumit® Immunoassays constituyen una alternativa sencilla y rápida a los métodos de inmunoensayo convencionales, incluidos los ELISA tipo sándwich y los Western blots. Este método basado en la bioluminiscencia puede completarse en tan sólo 30 minutos. Ofrecemos varios tipos de Lumit® Immunoassays para uso en investigación, incluidos kits específicos para detectar la fosforilación de proteínas, citoquinas, metabolitos o la unión del receptor Fc neonatal. También disponemos de reactivos de detección Lumit® y kits de marcaje para construir tus propios ensayos Lumit®.

¿Qué son los inmunoensayos?

Los inmunoensayos son métodos de detección prácticos y ampliamente utilizados que se basan en la capacidad de los anticuerpos para unirse a antígenos específicos y así poder detectarlos. Las técnicas ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assays) y Western blot son ejemplos típicos de inmunoensayos de uso común.

Los ELISA se realizan en placas multipocillo en varios formatos. En un ELISA tipo sándwich, un anticuerpo se une a la superficie de la placa y se utiliza para capturar un antígeno diana de una muestra como plasma o suero. Tras un lavado a fondo, se añade un segundo anticuerpo, que se une al antígeno, creando un "sándwich" anticuerpo-antígeno-anticuerpo. Este segundo anticuerpo puede marcarse con un sustrato enzimático que permita la detección, o puede detectarse con un anticuerpo secundario marcado de forma específica para cada especie (por ejemplo, IgG antihumana). En otros formatos ELISA, el antígeno diana puede unirse directamente a la placa y utilizarse para detectar anticuerpos presentes en una muestra. Estos anticuerpos unidos se detectan a continuación utilizando un anticuerpo secundario marcado.

En un inmunoensayo enzimático, la enzima unida al anticuerpo detector genera una señal de color proporcional a la cantidad de antígeno diana presente en la muestra. Dependiendo del formato del inmunoensayo, el grado de color puede detectarse y medirse mediante un lector de placas espectrofotométrico o de fluorescencia.

En el Western blot, las proteínas individuales presentes en una muestra se separan en un gel y se transfieren a una membrana de nitrocelulosa, que se expone a anticuerpos marcados dirigidos contra antígenos específicos. Tras el lavado, los anticuerpos unidos se visualizan por la generación de una señal (color, fluorescencia o quimioluminiscencia) generada por el anticuerpo primario marcado o un anticuerpo secundario.

Las técnicas ELISA y Western blot ofrecen ventajas de especificidad, sensibilidad y relativa facilidad de uso. Sin embargo, requieren mucho tiempo, ya que implican numerosos pasos de lavado e incubación. El número de pasos implicados también puede dar lugar a una variabilidad significativa de ensayo a ensayo.

Los Lumit® Immunoassays se diferencian de los Western blots y los ELISA en que proporcionan un método basado en la bioluminiscencia, sin lavado, para detectar diversas moléculas diana en un formato rápido y sensible. Los Lumit® Immunoassays se basan en la NanoLuc® Binary Technology (NanoBiT®). En los Lumit® Immunoassays, los anticuerpos o antígenos se marcan químicamente con las subunidades pequeña y grande de la luciferasa NanoBiT®, conocidas como SmBiT y LgBiT, respectivamente. En presencia de la molécula diana, las dos subunidades se aproximan, lo que permite que SmBiT y LgBiT formen una enzima activa y generen una señal de luminiscencia brillante, que se detecta mediante un lector de microplacas.