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Análisis forense de ADN: flujos de trabajo de electroforesis capilar

Promega ofrece soluciones completas para el análisis de muestras de ADN forense mediante electroforesis capilar (EC). Los productos incluyen reactivos y kits para todos los pasos en los distintos flujos de trabajo de análisis con EC.

Los productos incluyen tanto reactivos de preprocesamiento para hisopos y punciones de tarjetas de recogida de muestras, para su uso previo a la amplificación directa de muestras de bases de datos, como sistemas de purificación de ADN para muestras forenses. También ofrecemos el PowerQuant® System que permite una cuantificación precisa del ADN humano, y los PowerPlex® Systems para la amplificación STR de ADN específico del cromosoma Y o autosómico, que cumplen con los requisitos de las bases de datos mundiales y regionales. Para el análisis de muestras, la familia Spectrum de instrumentos de EC ofrece opciones de procesamiento de muestras de bajo y alto rendimiento.

Fundamentos del análisis mediante EC

La mayor parte del genoma humano es idéntica entre individuos. Sin embargo, existen pequeñas regiones con una mayor variabilidad, sobre todo en aquellas con secuencias repetitivas. Un ejemplo son las repeticiones cortas en tándem o STR (del inglés, Short Tandem Repeats) las cuales pueden variar en longitud entre los individuos, y en las que cada repetición consta de tres a cinco nucleótidos de ADN. El análisis de estas repeticiones revela un patrón característico para cada individuo, que se hereda del ADN paterno y materno. Las bases de datos de ADN para uso forense utilizan estos patrones STR para la identificación humana, y en cada una de las bases de datos nacionales existen requisitos para los loci de STR específicos que se incluyen. 

Para caracterizar estos patrones STR, o perfiles de ADN, se amplifica el ADN genómico humano mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con distintos sets de cebadores para cada STR analizado. Los cebadores se marcan con dyes fluorescentes y los productos amplificados se separan según su tamaño mediante electroforesis capilar (EC). La representación de la fluorescencia mediante el instrumento de EC da lugar a un conjunto de picos para cada canal asociado a los diferentes dyes, formando un electroferograma que sirve como "perfil" de ADN para ese individuo. El análisis estadístico del perfil de ADN y la comparación con bases de datos de referencia pueden predecir si el individuo coincide con un perfil de ADN conocido, con un alto poder de discriminación.