Transcripción in vitro
Los productos de transcripción in vitro incluyen sistemas de síntesis de ARN, extractos nucleares, ribonucleótidos, vectores para clonaje y productos complementarios para la transcripción, la extensión de cebadores y los estudios de expresión génica.
Los Riboprobe® Systems se utilizan para sintetizar sondas de ARN monocatenario de alta actividad específica o cantidades de microgramos de transcritos de ARN definidos a partir de insertos de ADN clonados.
Los RiboMAX™ RNA Production Systems generan grandes cantidades de transcritos de ARN tapados o sin tapar adecuados para reacciones de traducción in vitro o in vivo. El T7 RiboMAX™ Express Large-Scale RNA Production System es un sistema de transcripción in vitro diseñado para la producción consistente de grandes cantidades de ARN en poco tiempo. Con este kit se han generado cantidades milimétricas de transcritos de ARN de alta calidad de hasta 14kb.
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Comparación de kits de síntesis de ARN
Compara Riboprobe®, RiboMAX™ y RiboMAX™ Express System características y rendimiento de ARN.
| Riboprobe® Systems |
RiboMAX™ Large Scale RNA Production Systems | T7 RiboMAX™ Express Large Scale RNA Production System | T7 RiboMAX™ Express RNAi System | |
|---|---|---|---|---|
| Cat.# | ||||
| Tiempo | ||||
| Rendimiento de ARN (por 1ml reacción) | ≥2mg ARNds |
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| Radiomarcaje |  |
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| Promotor T3 | |
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| Promotor SP6 | |
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| Promotor T7 | |
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| Premixed de rNTPs | |
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| Compatible con nucleótidos modificados | |
NT = no testado.
1 = Compatible, pero require de pedido custom del buffer de transcripción sin nucleótidos.
Introducción a los métodos de síntesis de ARN
Los métodos de síntesis de ARN in vitro utilizan ARN polimerasa dependiente de bacteriófago de ADN, como la ARN polimerasa T7, T3 o SP6, para sintetizar ARN a partir de un molde de ADN. El ADN molde para las reacciones de transcripción in vitro incluye un promotor de ARN polimerasa aguas arriba de la secuencia de interés. La ARN polimerasa correspondiente se utiliza entonces para producir transcritos sintéticos de ARN para su uso como sondas de hibridación, como moldes para aplicaciones de traducción in vitro o en estudios estructurales (cristalografía de rayos X y RMN). Los transcritos de ARN sintetizados también se utilizan para estudiar la funcionalidad del ARN celular en procesos como el splicing o empalme, el procesamiento del ARN, el transporte intracelular, la infectividad viral y la traducción.
