Expresión de proteínas sin células

Los sistemas de expresión sin células proporcionan las herramientas para la producción de proteínas sin la propia célula. Estas herramientas incluyen componentes macromoleculares necesarios para la traducción, como ribosomas, ARNt, aminoacil-ARNt sintetasas y factores de iniciación, elongación y terminación. El método de expresión sin células es la forma más rápida de correlacionar el fenotipo (función de la proteína expresada) con el genotipo. Además, los sistemas de expresión de proteínas sin células son indispensables para la expresión de proteínas tóxicas, proteínas de membrana, proteínas víricas y proteínas que sufren una rápida degradación proteolítica por proteasas intracelulares. Los sistemas de traducción eucariótica más populares se originan a partir de lisados de reticulocitos de conejo (RRL) o de extractos de germen de trigo (WGE).

Los dos formatos principales de sistemas de expresión sin células son los sistemas de traducción basados en ARNm y los sistemas de transcripción y traducción acoplados basados en ADN de origen procariota y eucariota. Los sistemas de traducción de ARNm sin células se utilizan para la expresión de proteínas a partir de ARNm transcrito in vitro o de ARNm aislado de tejidos o células. Estos sistemas se utilizan para expresar proteínas individuales y proteínas múltiples en aplicaciones de alto rendimiento, como las tecnologías de visualización. Los sistemas de traducción sin células también son útiles para el análisis funcional y estructural del ARN o para estudiar aspectos de la maquinaria de traducción. Los sistemas de traducción de ADN sin células se utilizan para diversas aplicaciones en análisis funcionales de genomas y proteomas de bajo a alto rendimiento.